Adaptando la cocina como laboratorio para aislamiento de cepas

 

 

 

A falta de cajas petri ...frascos vacíos

 

 

 

Instrumentos de medición

 

 

 

 

Para poder saber cuanto agar necesitaría poner en cada frasco realice los siguientes cálculos y consideraciones

 

Medí en cada frasco el volumen de liquido necesario para proporcionar una buena superficie de siembra este volumen resulto ser de 40 ml para términos prácticos lo denominare Vf

 

En la etiqueta del agar se señala que se necesita añadir 39 gramos de agar por cada litro a preparar de medio, así que calcule cuanto agar se ocuparía para 40 mililitros

 

39 gr/L = x gr/ 40 ml

 

igualando las unidades.

 

39

gr

X

L

=

0.039

gr

 

L

 

1000 ml

 

 

ml

 

Despejando x

 

x  =

0.039

gr

X

40 ml  =

1.56 gr (Maf)

 

 

ml

 

 

 

 

 

Como no cuento con una balanza y todos mis instrumentos de medición son volumétricos me vi en la necesidad de calcular la densidad del agar para poder saber que volumen ocuparían  los 1.56 gramos de agar que necesitaría por frasco (Vaf)  así:

 

Agregue agua a un envase vacío de agar hasta alcanzar el nivel al cual suelen ser llenados los mismos cuando son empacados, al medir este volumen resulto ser de 700 mililitros  (Vne)

 

En la etiqueta del envase se señala que contiene 450 gramos de agar (Mne)

 

Densidad = masa / Volumen

 

Densidad del agar = Peso neto al llenado/ Volumen neto al llenado

 

Da= Mne/Vne = 450 gr/ 700ml = 0.643 gr/ml

 

Transformando mis 1.56 grms de agar a volumen tenemos:

 

Vfa = Maf / Da = (1.56 gr / (0.643 gr /ml )) = 2.42 ml

 

De los instrumentos con los que contaba el que se acercaba mas a esta medida era una cuchara de 2.5 ml así que esa fue la medida que use para cada frasco

 

 

 

Instrumentos para manipulación de la cepa en condiciones estériles Pinzas y cuter (navaja)

 

 

 

Olla de 21 litros de presión, usada para esterilizar los medios mediante vapor durante 15 min a 121°C

 

 

 

Medios después de ser esterilizados

 

 

 

Para lograr una mayor superficie de siembra se inclinaron los frascos con agar mientras este se enfría

 

 

 

Hongo de la ultima siembra

 

 

 

Como era un hongo grande fue seleccionado para el aislamiento vegetativo

 

 

 

La estufa de mi casa siendo adaptada como zona estéril, retire los quemadores y gracias al diseño de la estufa las salidas de gas se comportan como mecheros

 

 

 

 

 

Aislamiento vegetativo de cepa:

 

El hongo es cortado transversalmente para extraer un pequeño fragmento de micelio -de la zona blanca- Esto se realiza en la zona estéril y habiendo flameado la navaja antes de cortar el hongo

 

 

 

Frascos inoculados con hongo

 

 

 

Acercamiento a frasco inoculado

 

 

 

Escrito por Gamma Zaratustra Galindo Pérez

 

 

 

Hongología